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英文字典中文字典相关资料:


  • miRNA Real Time PCR,内参U6的Ct值24左右,目的基因 . . .
    我们做miRNA都是直接买专用的提取+逆转录试剂盒,有时候PCR也用专门的miRNA试剂盒。提取的miRNA浓度一般50都不到,但是逆转录后需要稀释100倍否则浓度太高,最后跑出的CT值U6一般20出头,目的miRNA25-35不等。
  • 丁香园 - 医学交流社区,分享临床经验、病例讨论、考试科研 . . .
    想实时荧光定量PCR检测细胞中某一个mirna的pri-mirna和pre-mirna表达水平,不太知道这两个要怎么设计引物?有战友了解吗?二者提完RNA之后用什么试剂盒反转录呢?实验室用的是mirna第一链CDNA合成加尾法试剂盒。不清楚pri-mirna和pre-mirna是不是有
  • 求助|茎环法miRNA做RT-PCR内参和目的基因CT值差距大
    后来楼主又把引物比例调成了2:0,直接没加U6的逆转录引物,做PCR出来,miRNA的CT值28 29,U6的CT值22 23。 稀释倍数已经调过了,上面是最好的结果,但还是不够理想,目前是希望两者的CT值再缩小一些,主要是想把内参的CT值调大一些,这样稀释倍数调浓一些就可以把目的基因的CT值调小。
  • 做miRNA的qPCR时溶解曲线出现双峰 - 丁香园论坛
    做miRNA的qPCR时溶解曲线出现双峰,用BIORAD跑的,20微体系,结果和条件如下,刚开始做PCR,不太会分析,哪位大神帮忙看看这是哪里出了问题 回复 点赞 收藏 邀请讨论
  • 丁香园 - 医学交流社区,分享临床经验、病例讨论、考试科研 . . .
    所以目前比较纠结的就是这个mirna引物能不能用 为什么在正常组织中基本上是单峰 到了肿瘤组织就是双峰了 肿瘤组织双峰的存在p出了2个产物会不会造成循环数减小,加大了mirna在肿瘤中的表达量(其实mirna在肿瘤中的表达根本没这么高?
  • 关于miRNA定量中内参U6引物设计问题
    大家好,我最近打算做一个miRNA的定量分析,反转录选的是茎环法。也找到物种的U6基因,但是不清楚U6基因反转录引物该怎么设计。另外,U6基因在定量PCR的上下游引物和平时定量PCR设计方法相同么。另外内参和目的基因的反转录是分开做还是在同一管
  • miRNA PCR溶解曲线 - 丁香园论坛
    最近在做miRNA实验,PCR溶解曲线中出现单峰双峰。 并且有些单峰Tm值是70 80度,有些是90度,该怎么判断单峰的Tm值,确定是否为miRNA的扩增? 谢谢!
  • 【求助】miRNA定量PCR时,内参需要单独设计反转录引物吗?
    我指的是茎环法设计的miRNA反转录引物,内参U6需要单独设计反转录引物吗?如果有能否告之,我是新手,非常感谢,另外发现不同的文献给的U6内参的序列不一致是什么原因?能否给一个可靠的内参序列呢,非常感谢!
  • 【求助】请问做microRNA的逆转录和PCR,能用普通的试剂 . . .
    是否一定要用专门的miRNA的试剂盒?我因为经费有限,之前都是用的普通的试剂盒做miRNA实验(实验室的师兄说可以用普通的,他说试剂都是通用的)。但是溶解曲线一直不是单峰。而且PCR的结果总与我预想的不一样。我问了试剂公司,他们说我试剂盒用错
  • 多个样本中miRNA跑了PCR之后怎么进行结果分析?
    跑了10对癌和癌旁患者miRNA的PCR,然后想要进行统计 看到文献大部分是用的miRNA 癌和癌旁表达的点图,而miR表达量有的是0 000X ,有的文献是X,不等。如果1样本 癌的 miRCT值-U6CT值 然后2的-ΔCT 计算的出来的值只有0 000X 想问一下到底该怎么算?





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